细胞介绍
该细胞系(全名:IPLB-SF-21-AE)来源于秋季粘虫草地贪夜蛾蛹(鳞翅目夜蛾科草地贪夜蛾种)的未成熟卵巢;细胞易受杆状病毒感染;也可参见SF-9 (DSMZ ACC 125 ),它是由SF-21衍生而来的。
细胞特性
1) 来源:昆虫-秋季粘虫(草地夜蛾)
2) 形态:90%为圆形细胞;10%梭形,多数贴壁,少数细胞悬浮
3) 含量:>1x10^6 细胞数
4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途:仅供科研使用。
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)半贴细胞和贴壁不牢(悬浮)细胞:T25瓶置于37℃培养箱中约2-3h,显微镜下观察细胞的情况,若细胞密度在60%以下,客户需收集T25瓶中的悬浮细胞离心后用完全培养基重悬后打回到原培养瓶中继续培养,若细胞生长70%-90%对细胞进行传代,传代时需要收集培养基中悬浮的细胞离心后回收。
备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备专用昆虫培养基(推荐TNM-FH )培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。
备注:该细胞为半贴半悬混合生长的细胞,活细胞发货的收到时会出现大部分细胞漂浮聚团生长,瓶中贴壁和悬浮的细胞均为活细胞,传代时是需要分别收集的,该细胞不适合用胰酶消化,建议收集贴壁细胞的时候使用细胞刮刀刮。
2) 培养条件;气相:空气,100%;该细胞培养不能通入CO2,如果没有条件准备空气气相100%的培养箱的,可以采用不透气密封盖的T25培养瓶来培养,培养过程中每天将细胞拿出培养箱换1-2次空气。 温度:28℃,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。